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天然胎牛血清中含有血小板來源的TGF

更新時(shí)間:2017-07-28  |  點(diǎn)擊率:1897

  天然胎牛血清的成分非常復(fù)雜,其中含有許多的生長因子。那么小編今天就為您介紹血小板來源的TGF因子。本文締一生物/締一生物為您分析天然胎牛血清中含有血小板來源的TGF。

 

  當(dāng)初發(fā)現(xiàn)胎牛血清中含有血小板來源的TGF,還是在1982年5月。美國梅奧臨床中心的細(xì)胞生物學(xué)系的研究小組在PNAS期刊上發(fā)表了一篇論文,題為Serum contains a plaet-derived transforming growth factor。在這篇文章里,作者描述了一個(gè)現(xiàn)象,體外在半固體培養(yǎng)基如軟瓊脂上培養(yǎng)AKR-2B細(xì)胞(來自小鼠胚胎的上皮細(xì)胞)或NRK細(xì)胞(來自大鼠的腎上皮細(xì)胞)時(shí),添加10%胎牛血清,細(xì)胞不會形成克隆。但升高培養(yǎng)基中胎牛血清的含量,細(xì)胞就有克隆的產(chǎn)生。胎牛血清濃度越高,細(xì)胞生長出來的克隆就越多(見下圖)。之前實(shí)際上也有人發(fā)現(xiàn),人的成纖維細(xì)胞作為一種貼壁細(xì)胞,在添加了20%胎牛血清的甲基纖維素中卻能懸浮生長,但如果只添加10%的胎牛血清,這種改變就消失了。

 

  圖:血清濃度對細(xì)胞在軟瓊脂上生長的影響。AKR-2B用·表示,NRK用X表示。

 

  可見,胎牛血清中確有一些因子,對細(xì)胞的生長產(chǎn)生影響。通過AKR-2B細(xì)胞或大鼠NRK細(xì)胞在軟瓊脂上生成克隆的現(xiàn)象,作者逐漸鑒定出一種參與這種現(xiàn)象的生長因子。作者首先用45%的飽和硫酸銨對胎牛血清進(jìn)行了沉淀,發(fā)現(xiàn)只有沉淀才有克隆刺激活性,而上清卻沒有。作者還發(fā)現(xiàn),新生牛血清和小牛血清的沉淀只有胎牛血清的一半的克隆刺激活性。

 

  作者進(jìn)一步用色譜層析的方法,發(fā)現(xiàn)沉淀中有一種可溶于酸的組分,其克隆刺激活性特別高,而且對胰蛋白酶和二硫蘇糖醇敏感,提示該蛋白可能有二硫鍵連接。通過發(fā)現(xiàn)人血清比血漿的克隆刺激活性高,作者推測凝血反應(yīng)可能會釋放出一種化合物。在用酸/乙醇分別提取了人和牛的血小板成分后,的確發(fā)現(xiàn)提取物具有很高的AKR-2B和 NRK克隆刺激活性。作者進(jìn)一步用色譜純化了血小板提取物,鑒定出一種組分克隆刺激活性zui高,它的分子量在14K至20K之間,與胎牛血清中色譜層析的組分非常近似。作者還嘗試了EGF和PDGF,發(fā)現(xiàn)都沒有針對這兩種細(xì)胞的克隆刺激活性。作者zui終鑒定出該成分為TGF,即轉(zhuǎn)化生長因子。這篇研究報(bào)道zui終沒有說是哪種TGF,但小編推測為TGF-β1。

 

  實(shí)際上,TGF-β的名字的由來也與該文在介紹部分提到的發(fā)現(xiàn)有關(guān),即這種細(xì)胞因子能使正常的成纖維細(xì)胞的表型發(fā)生轉(zhuǎn)化,即在表皮生長因子(EGF)同時(shí)存在的條件下,改變成纖維細(xì)胞貼壁生長特性而獲得在瓊脂中生長的能力,并失去生長中密度信賴的抑制作用。

 

     綜上所述,您是不是已經(jīng)對天然胎牛血清中含有血小板來源的TGF,有所了解。如果還有其他疑問,請咨詢締一生物/締一生物資深專家。

  參考文獻(xiàn):

 

  HAROLD L. MOSES, et al. Serum contains a plaet-derived transforming growth factor. Proc. NatL Acad. Sci. 1982, 79:5312-5316